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本实验教材包括四篇， 篇为实验基本要求及基本操作，这些基本实验知识不仅为后续的实验教学奠定了基础，而且在实验用到时可随时查找学习。第二篇为基本实验技术及基础实验，本篇涵盖了常用的分光光度技术、电泳技术、离心分离技术、层析技术、核酸分子杂交技术、重组DNA技术、聚合酶链反应技术、细胞培养技术、免疫学技术、微生物实验技术及相应的常规基础实验。先学习技术后进行实验操作不仅有助于学生掌握这些基本实验技术，而且有助于培养学生的基本实验操作技能。第三篇为综合实验，针对同一实验项目，融合了多种实验技术，有利于培养学生的科研思路和综合分析能力，有助于启发学生的逻辑性，形成严谨、开阔的思维。第四篇为自主设计实验，此篇首先介绍了自主设计性实验的基本过程、原则、模式、内容，进而对常用的核酸、蛋白质设计性实验进行了解析和方法的拓展，接着举例若干设计性实验题目，目的是引导学生进行科研设计，注重科研能力和创新能力的培养。为了便于学生的学习，本书在附录中还介绍了我院虚拟实验的使用、常用试剂的配制等内容，以备实验需要时查用。

篇 实验基本要求及基本操作

章 实验基本要求

节 实验课的要求

第二节 实验记录的要求

第三节 实验报告的书写要求

第四节 实验安全注意事项及意外事故的处理

第二章 实验基本操作

节 玻璃仪器和塑料器皿的清洗与使用

第二节 计量器具及使用

第三节 试剂配制方法

第四节 实验器材与溶液的消毒

第五节 溶液的混匀

第六节 溶液的pH测定

第七节 实验样品的制备

第八节 常用实验动物及基本操作

第三章 常用仪器使用

节 显微镜的基本结构和使用

第二节 分光光度计的基本结构和使用

第三节 离心机的基本类型和使用

第四节 电泳系统

第五节 电子天平的分类和使用

第六节 培养箱的使用及注意事项

第七节 PCR扩增仪

第八节 流式细胞仪

第二篇 基本实验技术及基础实验

第四章 分光光度技术

实验一 考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量

实验二 双缩脲法测定蛋白质含量

实验三 Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质浓度

实验四 血清总胆固醇的测定(硫磷铁法)

实验五 血清甘油三酯(TG)含量测定(GPO一PAP法)

实验六 血清谷丙转氨酶活性测定

第五章 电泳技术

实验一 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳

实验二 DNA的琼脂糖凝胶电泳

实验三 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳

实验四 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分离蛋白质

第六章 层析技术

实验一 氨基酸的离子交换层析分离

实验二 凝胶柱层析分离蛋白质

第七章 离心分离技术

实验一 差速离心法提取鼠肝核蛋白体RNA

实验二 小鼠脾单个核细胞的分离

第八章 多聚酶链体外扩增技术

第九章 免疫学技术

节 抗体制备技术

实验抗原与免疫血清的制备

第二节 抗原、抗体检测技术

实验一 沉淀试验

实验二 凝集试验

实验三 免疫比浊试验

实验四 流式细胞术检测细胞凋亡

第三节 免疫标记技术

实验一 酶联免疫吸附试验

实验二 免疫金标记技术

实验三 免疫组织化学技术

第四节 免疫细胞功能检测技术

实验 吞噬细胞功能测定

第十章 细菌分析技术

实验一 显微镜的使用与维护

实验二 细菌的分离培养和接种技术

实验三 细菌的生化反应

实验四 细菌的分布

实验五 消毒 效果观察

实验六 革兰染色法

实验七 纸片扩散法药物敏感性试验

实验八 葡萄球菌属细菌的培养和鉴定

实验九 埃希菌属细菌的培养和鉴定

实验十 沙门菌属细菌和志贺菌属细菌的培养与鉴定

第十一章 分子杂交与免疫印迹技术

实验一 Southern印迹杂交

实验二 Northern印迹杂交

第十二章 细胞培养与转染技术

实验一 细胞的冻存与复苏

实验二 细胞MTT检测方法

第三篇 综合实验

第十三章 基因组提取、目的基因扩增及鉴定

实验一 基因组DNA的提取及定量

实验二 PCR扩增目的基因

实验三 琼脂糖凝胶电泳鉴定目的基因片段

第十四章 血清白蛋白的提取、定量和检测

实验一 血清白蛋白的提取和分离

实验二 血清白蛋白的定量

实验三SDS—PAGE检测血清白蛋白纯化效果

第十五章 脲酶动力学实验

实验一 脲酶的提取和活性测定

实验二 脲酶Km值的简易测定

实验三 正交实验优化酶促反应条件

实验四抑制剂对酶促反应的影响

第十六章 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA分子导入原核细胞、

提取、纯化鉴定

实验质粒DNA的提取、纯化和检测

第十七章 蛋白质免疫印迹实验

实验一 动物组织总蛋白质的提取

实验二 蛋白质含量测定(BCA法)

实验三 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质

实验四 蛋白质转膜

实验五 免疫杂交及检测

第四篇 自主设计实验／20l

第十八章 设计性实验综述

节 实验设计的意义

第二节 实验设计的原则

第三节 实验设计的基本内容

第四节 实验设计的模式

第十九章 设计性实验解析

节 核酸生化实验设计解析

第二节 蛋白质生化实验设计解析

第二十章 设计性实验

实验一 miRNA研究及与临床的关系

实验二 肿瘤细胞或组织相关细胞因子检测分析实验的设计

实验三 蛋白质等电点

实验四 天然产物中多糖的提取、纯化与鉴定

附录

参考文献

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